| Resumen |
- Este estudio se realizó con el propósito de analizar los cambios en astrocitos y células de microglia del cerebro de ratas adultas que fueron lesionadas químicamente al nacimiento mediante inyecciones SC de glutamato, a fin de entender las repercusiones de este tipo de daño, inflingido durante una etapa cerebral muy vulnerable por la rápida reorganización sináptica que se produce. Como consecuencias adversas, en el cerebro adulto se esperaría un patrón anormal de conexiones sinápticas, reactividad glial y sitemas enzimáticos implicados con el restablecimiento de la homeostasis del tejido cerebral lesionado, particularmente en las áreas más sensibles a los fenómenos neuroexcitotóxicos, debido a que contienen receptores a neurotransmisores excitatorios, como la corteza cerebral prefrontal, hipocampo y cuerpo estriado, mismas que fueron seleccionadas para su estudio, se hicieron estudios de doble marcaje inmunocitoquímico para revelar la presencia de óxido nítrico sintasa en astrocitos (inmunopositivos a proteína acídica fibrilar glial) y células de microglia (marcadas con Isolectina-B4) , como un dato indicativo de respuesta frente al estrés oxidativo neuroexcitotóxico, además se realizó un estudio de proliferación astrocitaria para conocer si se produjo mitosis de estas células en respuesta al daño neonatal, utilizando un compuesto análogo de la timidina (BrdU) que se incorpora a las células en la fase "S" del ciclo celular. Los resultados obtenidos de este estudio nos mostraron que se produjo astrogliosis en las tres regiones examinadas, manifestada por un aumento del número de células, e hipertrofia de sus prolongaciones, que incrementaron la densidad de superficie, -cuantificada mediante un sistema automatizado para análisis de imágenes. Las células de microglia también sufrieron transformación morfológica en todas las regiones analizadas, ellas mostraron un mayor tamaño y complejidad en sus arborizaciones citoplasmáticas, responsable del aumento en la densidad de superficie. Del doble marcaje de astrocitos y microglia con anticuerpos dirigidos contra óxido nítrico sintasa constitutiva (ONSc) resultó un aumento de la subpoblación doblemente marcada, por los efectos neuroexcítotóxicos del glutamato neonatal, a pesar que esta isoforma de la enzima que sintetiza al óxido nítrico no corresponde a localización glial, pudo observarse en cortes del tejido cerebral de ratas controles con la metodología utilizada y resultó incrementada en respuesta al daño químico. En el hipocampo se observó la mayor transformación astrocitaria y de células de microglia, en esta región también se identificó la mayor subpoblación glial inmunopositiva a ONS, estos datos sugieren una mayor sensibilidad de este órgano frente a los efectos nocivos del glutamato, por la importante función que desempeña en las actividades de aprendizaje y memoria, resulta de fundamental importancia establecer si las alteraciones morfológicas observadas se reflejarán en trastornos cognoscitivos. En resumen; la administración neonatal de glutamato monosódico por inyección SC (4mg/gr de peso en los días 1,3, 5 y 7) provocó reactividad glial en la corteza cerebral prefrontal, hipocampo y cuerpo estriado de ratas sacrificadas a los 60 días de edad, junto con hiperplasia de astrocitos e incremento en la subpoblación de astrocitos y células de microglia inmunopositiva para ONS, lo que indica una respuesta de estas células frente al daño oxidativo neuroexcitatorio por glutamato. Es necesario realizar otros estudios adicionales para determinar los efectos de las alteraciones observadas en el cerebro adulto, sobre las actividades cerebrales relacionadas con los trastornos neuroquímicos provocados por el glutamato, para ello será de gran utilidad el presente modelo. |
Tesis de posgrado