| Resumen |
- RESUMEN La aterosclerosis es una de las características más importantes que se presentan en los pacientes con Síndrome de Werner (SW: o envejecimiento prematuro) y una de las principales causas de muerte. La relación de PAI-1 (inhibidor de los activadores del plasminogeno tipo 1 con un gen recientemente clonado llamado helicasa de Werner (WRNp) y su relación con el proceso aterosclerótico es lo que se pretende estudiar en este proyecto. Una gran variedad de estudios apuntan al hecho de que una fibrinólisis defectuosa, a través de una sobreproducción de PAI-1p (una proteína de respuesta aguda) es causa inequívoca de aterosclerosis y se ha demostrado que PAI-1p es expresada a altos niveles en tejido vascular de individuos de edad avanzada y en cultivo de fibroblastos con fenotipo senescente, comparado con sus contrapartes jóvenes. Además PAI-1p es sobreexpresada dramáticamente (750-1000 veces más) en cultivos primarios de fibroblastos de pacientes con SW comparada con fibroblastos de individuos normales. Recientemente se ha desarrollado en ratón transgénico, el cual no expresa la proteína WRNp. El presente estudio se diseñó para demostrar la relación que existe entre la expresión de WRN y la sobreexpresión de PAI-1, puesto que suponemos que WRNp, actúa como factor de transcripción, que regula la expresión del gen PAI-1. Por ello, la primera parte de este estudio fue observar los niveles de expresión de WRNp y PAI-1p en ratones normales mediante RT-PCR en diferentes tejidos y a diferentes edades; así como demostrar la falta de regulación de la expresión (sobreexpresión) de PAI-1, cuando WRNp no esta presente (ratones transgénicos). La asociación de WRNp como factor de transcripción de PAI-1, fue estudiada mediante ensayos de retardamiento de la movilidad electroforética y comprobada por ensayos de Western blot. Nuestros resultados indican que la proteína WRNp tiene actividad supresora de la expresión del gen PAI-1, por lo tanto, cuando el gen WRN es inhibido, la expresión de la proteína PAI-1p es elevada. |
Tesis de posgrado