| Título |
| Respuesta bioquímica y molecular de la simbiosis Phaseolus vulgaris-Glomus intraradices, al estrés de agua |
|
| Enlace | - https://sistemas.ucol.mx/tesis_posgrado/resumen1438.htm |
| Autor | - LAURA RAQUEL MARTÍNEZ MARTÍNEZ |
| Resumen |
- El incremento de la producción de derivados tóxicos de oxígeno es considerado una característica común de condiciones de estrés. El sistema de defensa antioxidante de la planta comprende una variedad de moléculas antioxidantes y enzimas. El objetivo de esta investigación fue estudiar el efecto de la sequía sobre el patrón de expresión del gen que codifica a la catalasa a nivel transcripcional y de actividad enzimática en plantas de Phaseolus vulgaris colonizadas con Glomus intraradíces en condiciones de humedad y sequía. Mediante el uso de oligonucleótidos degenerados se amplificó un segmento conservado del gen que codifica para la catalasa de frijol el cual se clonó y secuenció. Este nuevo gen se registró en el banco de genes (GenBank) como PvCat1 con el número de acceso 486699. La secuencia deducida de aminoácidos de PvCat1 mostró 95 porciento de identidad con la catalasa de soya (AFO35256). Para evaluar la transcripción del gen PvCat-1 se realizaron los ensayos de RT-PCR cuantitativo que demostraron la acumulación del RNA Pvcat-1 en plantas colonizadas en condiciones de sequía. La hibridación tipo Northern confirmó la presencia de un mRNA de 1.2 kb en estas plantas. Por otro lado, se detectó por hibridación in situ el mRNA cat-1 en epidermis y corteza. La actividad enzimática de catalasa aumentó en plantas colonizadas. En P. vulgaris la tolerancia a sequía se asoció con la acumulación de mRNA Cat-1 e incrementos en los niveles de actividad de la catalasa, estos últimos pueden ser el resultado de la actividad aditiva presente en el hongo micorrízico y el frijol. Los niveles de actividad de nitrato reductasa resultaron menores en plantas colonizadas, lo cual concuerda con la hibridación tipo Western, esto puede atribuirse a cambios en la expresión de genes y en la actividad en condiciones de estrés. The increased production of toxic oxygen species derivatives is considered to be common feature of stress conditions. The antioxidant defence system of the plants comprises a variety of antioxidant molecules and enzymes. The objective of this research was to study the effect of drought on the catatase gene expression pattern at transcriptional and enzymatic activity level. Phaseolus vulgaris plants, colonized with Glomus intraradices was used as a model grown under humidity and drought conditions. A conserved PCR fragment encoding catalase activity was obtained by using newly designed degenerated oligonucleotides. DNA fragment was cloned, sequenced and compared with the GenBank. The new gene was registered in the Data base as PvCat-1 (access number 486699). The deduced aminoacid sequence displayed a 95 percent of identity with soybean catalase gene (AF035256). Quantitative RT-PCR assay were performed in order to evaluate transcription of PvCat1, which showed accumulation of mRNA in colonized plants under drought conditions. Northern blot hybridization confirmed the presente of a mRNA of 1.2 kb in these plants. On the other hand, in sítu hybridization in root tissue showed mRNA detection present in epidermis and cortex. Indeed catalase enzymatic activity was found highly aumented in colonized plants. In common bean, drought tolerance was associated wìth the accumulation of Cat-1 mRNA as well with higher levels of catalase enzymatic activity, which could be interpreted as an additive activity contributed by the plant and fungus. Nitrate reductase activity was reduced in infected plants, in agreement with the immunodetection performed by Western blot. This resulted can be interpreted as changes in the gene expression pattern due to the water stress conditions. |
| Originador |
- Universidad de Colima |
| Distribuidor |
- Universidad de Colima |
| Idioma |
- Español |
| Categoría |
- Tesis posgrado |
| Colección | - Tesis de posgrado (1011) |
| Idioma del recurso |
- Español |
| Lugar |
- Colima, México |
| Propósito |
- Difusión |
| Temas | - Tesis, Doctorado (148) |
| Notas |
- Tesis presentada en Julio de 2003
, Programa: Doctorado en Ciencias, Área: Biotecnología, Facultad de Ciencias Biológicas y Agropecuarias, Generación 1998 - 2001 |
Tesis de posgrado