| Resumen |
- Antecedentes. El choque hemorrágico (CH) resulta en un estrés oxidativo celular y en una inducción de respuesta inflamatoria, con una expresión incrementada de un número de mediadores proinflamatorios y de citocinas. Nosotros investigamos la capacidad del donador de Oxido Nítrico (NO) Nitroprusiato de Sodio (NP) para reducir la lesión tisular en un modelo animal de CH no controlado. Métodos. Setenta y dos ratas Sprague-Dawley de entre 250 y 300 gramos fueron sometidas a un modelo de CH no controlado. Fueron incluidos cuatro grupos de animales en este estudio (n = 18 por grupo): sham/salina, sham/NP, shock/salina, shock/NP. El diseño experimental consistió en el desarrollo de choque hemorrágico (3ml/100g) en un periodo de 15 minutos; corte de cola (75porciento) y administración de la droga a los 30 minutos; reanimación hídrica (RH) con solución de Ringer Lactado (RL) para alcanzar una presión arterial media (PAM) de 40 mmHg; una fase hospitalaria de 60 minutos con hemostasia y RH con solución de RL para alcanzar una PAM de 70 mmHg; y una fase de observación de 3 días. El tratamiento al inicio de la reanimación consistió en solución salina (grupos 1, 3) o nitroprusiato de sodio (0.5 mg/kg) (grupos 2, 4). Fueron evaluados los siguientes parámetros: requerimientos hídricos para reanimación, pruebas de función hepática, mieloperoxidasa de tejido hepático (MPO), histología hepática, expresión de mRNA de citocinas(IL- alfa, IL-lambdabeta, TNtetabeta, IL-3, IL-4, IL-5, EL-6, IL-10, TNtetaalfa , IL-2, IF g) en el hígado mediante Prueba de Protección de Ribonucleas con Multisonda (PPR) y sobrevida de tres días. Resultados. El nitroprusiato de sodio redujo significativamente los requerimientos hídricos para reanimación (p =0.0001). También observamos una mejoría estad ísticamente significativa en las pruebas que demuestran lesión hepática, infiltración neutrofilica evidenciada por UPO, y estudios histológicos. La sobrevida también se incrementó de 40porciento en los controles a 60 porciento con el tratamiento con NP. La expresión de citocinas se redujo con el tratamiento con NP. Conclusión. Estos datos sugieren que el exceso de NO media la lesión hepática inducida por el CH y que la supresión de la biodisponibilidad de NO con el donador de NO nitroprusiato de sodio puede reducir las consecuencias fisiopatológicas de hemorragia severa, posiblemente por el barrimiento del anión superóxido (O2 ), limitando así la producción de radicales más tóxicos. Background. Hemorrhagic shock (HS) results in an oxidative stress to cells and in the induction of the inflammatory response, with an increased expression of a number of proinflammatory mediators and cytokines. We tested the ability of the Nitric Oxide (NO) donor Sodium Nitroprusside (NP) to reduce tissue injury in a rodent model of uncontrolled hemorrhagic shock. Methods. Seventy- two Sprague- Dawley rats weighing 250 to 300 grams were subjected to a model of uncontrolled hemorrhagic shock. Four groups of animals were included in this study (n = 18 per group): sham/saline, sham/NP, shock/saline, shock/NP. Experimental design consisted of the development of hemorrhagic shock (3m1/l00g) in a 15- minute period; tail amputation (75percent) and drug administration at 30 minutes; fluid resuscitation (FR) with lactated Ringers (LR) solution to reach a mean arterial pressure (MAP) of 40 mmHg; a hospital phase of 60 minutes with hemostasis and FR with LR solution to reach a MAP of 70 mmHg; and a 3 day observation phase. The treatment at the beginning of resuscitation included either normal saline (groups 1, 3) or sodium nitroprusside (0.5 mg/kg) (groups 2, 4). The following parameters were evaluated: fluid requirements for resuscitation, liver injury tests, liver tissue myeloperoxidase (WO), liver histology, cytokine (IL- alfa, IL-lambdabeta, TNtetabeta, IL-3, IL-4, IL-5, EL-6, IL-10, TNtetaalfa , IL-2, IF g) mRNA expression in the liver by Multi-probe Ribonuclease Protection Assay (RPA), and three day survival. Results. Sodium nitroprusside significantly reduced fluid requirements for resuscitation (p =0.0001). We also observed an improved statistically significant difference in tests demonstrating hepatic injury (p =0.0001), neutrophil infiltration as evidences by liver MPO (p <0.05), and histology studies (p =0.001). Survival was also increased from 40percent in controls to 60percent with NP treatment. The expression of cytokines was reduced by NP treatment. Conclusion. These data suggest that excess NO mediates hemorrhage- induced liver injury, and that the suppression of NO bioavailability with the NO donor sodium nitroprusside may reduce the pathophysiological consequences of severe hemorrhage, possib ly by scavenging superoxide (O2), thus limiting the production of more aggressive radicals. |
Tesis de posgrado