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Título
Enhancing B and T cell immune responses against the HIV-1 envelope using protein and poxvirus based vaccines
Enlace - https://repositorio.uam.es/bitstream/handle/10486/686452/chithatur_raman_suresh.pdf?sequence=1&isAllowed=y
Autor - Chithathur Raman, Suresh
Resumen - El objetivo del proyecto ha estado dirigido a establecer procedimientos de inmunización
en el modelo de ratón incorporando una serie de inmunógenos que fueran capaces de
inducir respuestas inmunes tanto humorales (anticuerpos) como celulares (linfocitos T
CD8+
, Tfh y células B de centros germinales) con capacidad potencial para controlar la
infección por el virus de la inmunodeficiencia humana tipo 1 (VIH-1).
La novedad del proyecto radica en la generación de una proteína de fusión compuesta
por la glicoproteína GP120 del VIH-1 subtipo C (el subtipo más prevalente) fusionada
en su extremo C-terminal con la proteína 14K (gen A27L) del virus vaccinia; el diseño
se centra en mejorar la eficacia del antígeno GP120C mediante su oligomerización
mediada por la sección de la proteína 14K. Las mejoras en la respuesta inmune
obtenidas por la fusión de antígenos heterólogos con la proteína 14K del virus vaccinia,
han sido previamente demostradas por el laboratorio del Dr. Esteban en el modelo de
Malaria mediante la fusión de la proteína 14K a la proteína CS (circumsporozoito) de
Plasmodium falciparum.
En el proyecto de Tesis se propuso generar tres tipos diferentes de inmunógenos:
proteína purificada GP120C14K, vector de DNA expresando la proteína de fusión y
vector viral MVA expresando la proteína de fusión. Al mismo tiempo se generaron
vectores equivalentes pero expresando la proteína GP120C como control para los
análisis estructurales, funcionales e inmunológicos.
Se ha realizado el diseño de las diferentes proteínas y la generación de líneas celulares
CHO transfectadas de forma estable para la producción constitutiva de la proteína de
fusión GP120C14K o de la proteína monomérica GP120C; ambas proteínas se han
purificado mediante columnas de afinidad de lectina y cromatografía de exclusión por
tamaño. Asímismo, se ha llevado a cabo la caracterización estructural, el análisis
bioquímico y biofísico, microscopía electrónica y difracción de rayos X (en proceso).
Se ha generado el vector recombinante basado en el virus modificado de Ankara (MVA)
expresando el antígeno GP120C14K siguiendo los protocolos estándar de
recombinación homóloga. El virus MVA-GP120C14K resultante se ha caracterizado in
vitro, habiéndose evaluado su capacidad de crecimiento, la estabilidad del antígeno
Originador - Universidad Autónoma de Madrid
Distribuidor - Biblioteca de Ciencias de la Salud
Idioma - Español
Categoría - Tesis posgrado
Colección - Recursos digitales para nivel superior (793)
Idioma del recurso - Inglés
Tesauro - OCED
Temas - Sida (2)
- Biología (20)
- Biomedicina (2)

Para citar este artículo, le recomendamos el siguiente formato:
Chithathur Raman, Suresh. Enhancing B and T cell immune responses against the HIV-1 envelope using protein and poxvirus based vaccines.

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