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Enlace | - https://repositorio.uam.es/bitstream/handle/10486/686452/chithatur_raman_suresh.pdf?sequence=1&isAllowed=y | |
Autor | - Chithathur Raman, Suresh | |
Resumen | - El objetivo del proyecto ha estado dirigido a establecer procedimientos de inmunización en el modelo de ratón incorporando una serie de inmunógenos que fueran capaces de inducir respuestas inmunes tanto humorales (anticuerpos) como celulares (linfocitos T CD8+ , Tfh y células B de centros germinales) con capacidad potencial para controlar la infección por el virus de la inmunodeficiencia humana tipo 1 (VIH-1). La novedad del proyecto radica en la generación de una proteína de fusión compuesta por la glicoproteína GP120 del VIH-1 subtipo C (el subtipo más prevalente) fusionada en su extremo C-terminal con la proteína 14K (gen A27L) del virus vaccinia; el diseño se centra en mejorar la eficacia del antígeno GP120C mediante su oligomerización mediada por la sección de la proteína 14K. Las mejoras en la respuesta inmune obtenidas por la fusión de antígenos heterólogos con la proteína 14K del virus vaccinia, han sido previamente demostradas por el laboratorio del Dr. Esteban en el modelo de Malaria mediante la fusión de la proteína 14K a la proteína CS (circumsporozoito) de Plasmodium falciparum. En el proyecto de Tesis se propuso generar tres tipos diferentes de inmunógenos: proteína purificada GP120C14K, vector de DNA expresando la proteína de fusión y vector viral MVA expresando la proteína de fusión. Al mismo tiempo se generaron vectores equivalentes pero expresando la proteína GP120C como control para los análisis estructurales, funcionales e inmunológicos. Se ha realizado el diseño de las diferentes proteínas y la generación de líneas celulares CHO transfectadas de forma estable para la producción constitutiva de la proteína de fusión GP120C14K o de la proteína monomérica GP120C; ambas proteínas se han purificado mediante columnas de afinidad de lectina y cromatografía de exclusión por tamaño. Asímismo, se ha llevado a cabo la caracterización estructural, el análisis bioquímico y biofísico, microscopía electrónica y difracción de rayos X (en proceso). Se ha generado el vector recombinante basado en el virus modificado de Ankara (MVA) expresando el antígeno GP120C14K siguiendo los protocolos estándar de recombinación homóloga. El virus MVA-GP120C14K resultante se ha caracterizado in vitro, habiéndose evaluado su capacidad de crecimiento, la estabilidad del antígeno |
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Originador | - Universidad Autónoma de Madrid | |
Distribuidor | - Biblioteca de Ciencias de la Salud | |
Idioma | - Español | |
Categoría | - Tesis posgrado | |
Colección | - Recursos digitales para nivel superior (793) | |
Idioma del recurso | - Inglés | |
Tesauro | - OCED | |
Temas | - Sida (2) - Biología (20) - Biomedicina (2) |
Para citar este artículo, le recomendamos el siguiente formato: |
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Chithathur Raman, Suresh. Enhancing B and T cell immune responses against the HIV-1 envelope using protein and poxvirus based vaccines. |